製品

免疫組織化学用DOG1抗体試薬

DOG1 抗体試薬——一次抗体

陽性対照:
GIST
細胞局在化:
Cytoplasm/cell membrane
応用:
IHC-P
二次抗体:
iVision™
仕様/ml:
1、3、6、0.2（Concentrated）

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製品の詳細

【商品名】

DOG1 抗体試薬——一次抗体

【使用目的】

研究使用のみ。DOG1 抗体試薬は、免疫組織化学的検出システムを使用して FFPE 組織の切片を顕微鏡で観察し、 DOG1 を定性的に同定するために使用することを目的としています。

【原則】_

DOG1 遺伝子は染色体 11q13 に位置し、そのタンパク質構造には 8 つの膜貫通機能領域があります。研究により、DOG1 タンパク質が GIST で選択的に発現することが確認されており、DOG1 は別の GIST マーカー CD117 と比較して、GIST のより高感度で特異的なマーカーです。一次抗体を添加して組織切片上の抗原に結合させ、HRP標識二次抗体結合一次抗体を使用して二次抗体-一次抗体-抗原複合体を形成します。 DAB 発色溶液を添加すると、HRP は酵素基質と反応して褐色の不溶性反応生成物を生成します。これは間接的に抗原の存在を示します。

【主な成分】

I免疫グロブリン、抗体希釈剤

【収納】

2～8℃ で18 ヶ月保存。

【サンプル要項】

FFPE 組織は通常、ミクロトームで3 ～5 μ mの薄さに切断されます。これらのセクションは、組織接着剤でコーティングされているスライドガラスにマウントされます。

【プロトコル】

1. サンプル調製：スライドをキシレンⅠ 、 Ⅱ 、 Ⅲ で5分間脱パラフィン処理；スライドを 100%、100%、 95% 、 75% のアルコールにそれぞれ 2 分間ずつ移す。スライドを脱イオン水で 30 秒間洗浄します。

2 . ブロッキング：切片を 3% H ₂ O ₂ 溶液中で室温で5分間インキュベートすることにより、内因性ペルオキシダーゼ活性をブロックします。スライドを脱イオン水で 30 秒間洗浄します。

3 . 抗原賦活化：EDTA 抗原賦活化バッファーを 100 ℃に加温します。その後、スライドを沸騰したバッファーに入れ、15 ～20 分間加熱を続けます。30分自然冷却。サンプルを洗浄バッファーですすいでください。

4 . 一次抗体のインキュベーション: スライドを排出します。一次抗体を組織に加え、室温で 30 分間インキュベートします。(コントロールとして抗体希釈液または PBS を使用) 。スライドを PBST で2 回、各回 5 分間洗浄します。一次抗体が濃縮されている場合は、包装の情報に従ってRTU（ready to use）に希釈してください。

5. 二次抗体 : スライドを排出します。二次抗体を組織に加え、室温で 20 分間インキュベートします。スライドを PBST で2 回、各回 5 分間洗浄します。

6. DAB ：スライドを排出します。DAB を組織に加え、室温で 5 分間インキュベートします。スライドを脱イオン水ですすいでください。

7. ヘマトキシリン染色：スライドを排出します。組織にヘマトキシリンを加え、室温で 5 分間インキュベートします。スライドを水で洗い流します。区別するために酸溶液を使用してください。スライドを水で洗い流します。

8.脱水：スライドを75% 、 95% 、 100% アルコールで2分間脱水します。スライドを乾燥させます。封入剤を使用して、染色された組織をカバーガラスで覆います。

【ポジティブローカリゼーション】

1. 正の局在:細胞質/ 膜.

2. ポジティブコントロール: GIST .

【注意事項】

1. 使用前に説明書をよく読み、キットのすべてのコンポーネントに精通してください。操作中は指示に厳密に従ってください。

2. キットまたはキットコンポーネントを使用しないでください。

3. 訓練を受けた専門家のみがこのキットを使用できます。試薬を取り扱う際は、適切な白衣と使い捨て手袋を着用してください。

4. 薬品が皮膚、目、粘膜に触れないようにしてください。