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免疫組織化学用WT1抗体試薬

WT1抗体試薬——一次抗体

陽性対照:
Mesothelioma
細胞局在化:
Nucleus
応用:
IHC-P
二次抗体:
iVision™
仕様/ml:
1、3、6、0.2（Concentrated）

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製品の詳細

【商品名】

WT1 抗体試薬——一次抗体

【使用目的】

研究使用のみ。WT1 抗体試薬は、免疫組織化学的検出システムを使用して FFPE 組織の切片を顕微鏡で観察し、 WT1 を定性的に同定するために使用することを目的としています。

【原則】_

WT1 は、WT1 遺伝子の変異によって引き起こされる腎臓の胎児性悪性腫瘍であるウィルムス腫瘍 1 にちなんで名付けられた転写因子です。泌尿生殖器系の発達に不可欠な役割を果たします。WT1 の発現の変異および調節不全は、泌尿生殖器系および他の組織に影響を与えるさまざまな症候群を引き起こします。一次抗体を添加して組織切片上の抗原に結合させ、HRP標識二次抗体結合一次抗体を使用して二次抗体-一次抗体-抗原複合体を形成します。 DAB 発色溶液を添加すると、HRP は酵素基質と反応して褐色の不溶性反応生成物を生成します。これは間接的に抗原の存在を示します。

【主な成分】

I免疫グロブリン、抗体希釈剤

【収納】

2～8℃ で18 ヶ月保存。

【サンプル要項】

FFPE 組織は通常、ミクロトームで3 ～5 μ mの薄さに切断されます。これらのセクションは、組織接着剤でコーティングされているスライドガラスにマウントされます。

【プロトコル】

1. サンプル調製：スライドをキシレンⅠ 、 Ⅱ 、 Ⅲ で5分間脱パラフィン処理；スライドを 100%、100%、 95% 、 75% のアルコールにそれぞれ 2 分間ずつ移す。スライドを脱イオン水で 30 秒間洗浄します。

2 . ブロッキング：切片を 3% H ₂ O ₂ 溶液中で室温で5分間インキュベートすることにより、内因性ペルオキシダーゼ活性をブロックします。スライドを脱イオン水で 30 秒間洗浄します。

3 . 抗原賦活化：EDTA 抗原賦活化バッファーを 100 ℃に加温します。その後、スライドを沸騰したバッファーに入れ、15 ～20 分間加熱を続けます。30分自然冷却。サンプルを洗浄バッファーですすいでください。

4 . 一次抗体のインキュベーション: スライドを排出します。一次抗体を組織に加え、室温で 30 分間インキュベートします。(コントロールとして抗体希釈液または PBS を使用) 。スライドを PBST で2 回、各回 5 分間洗浄します。一次抗体が濃縮されている場合は、包装の情報に従ってRTU（ready to use）に希釈してください。

5. 二次抗体 : スライドを排出します。二次抗体を組織に加え、室温で 20 分間インキュベートします。スライドを PBST で2 回、各回 5 分間洗浄します。

6. DAB ：スライドを排出します。DAB を組織に加え、室温で 5 分間インキュベートします。スライドを脱イオン水ですすいでください。

7. ヘマトキシリン染色：スライドを排出します。組織にヘマトキシリンを加え、室温で 5 分間インキュベートします。スライドを水で洗い流します。区別するために酸溶液を使用してください。スライドを水で洗い流します。

8.脱水：スライドを75% 、 95% 、 100% アルコールで2分間脱水します。スライドを乾燥させます。封入剤を使用して、染色された組織をカバーガラスで覆います。

【ポジティブローカリゼーション】

1. 正の局在化：核。

2. 陽性対照：ウィルムス腫瘍。

【注意事項】

1. 使用前に説明書をよく読み、キットのすべてのコンポーネントに精通してください。操作中は指示に厳密に従ってください。

2. キットまたはキットコンポーネントを使用した後は使用しないでください。

3. 訓練を受けた専門家のみがこのキットを使用できます。試薬を取り扱う際は、適切な白衣と使い捨て手袋を着用してください。

4. 薬品が皮膚、目、粘膜に触れないようにしてください。